Paso 10: Fluorómetro lecturas de muestras y análisis de datos
1. si el R ^ 2 valor es aceptable, leer las 50 muestras (incluyendo sus duplicados) en el fluorómetro y registre el valor de la libreta de laboratorio
Ejemplo: Especies de microorganismos: {78301
{80231.
duplicado de la lectura en la parte inferior
La lectura duplicada debe ser un valor similar a la primera lectura. Si no, hay suficiente muestra en ambos los tubos para releerlo. Si uno de los tubos tiene un fluorómetro cerca valor de tubo de 11 estándares de lectura, significa probablemente que ninguna DNA fue agregada. Sacar ese valor del fluorómetro si ese es el caso y vuelva a ejecutar esa muestra.
2. antes de entrar los valores de Fluorímetro en la hoja de excel, revisar la gama del fluorómetro diluyeron de valores para la 1:20 muestras.
Asegúrese de que ninguna de las lecturas de la muestra son mayor que el valor estándar más alto. Si eso pasa tendrás volver a ejecutar
muestra a una dilución mayor.
3 . Entrar en cada uno de los valores individuales que lees en las células azul primeras y segunda como se indica en la figura 3. El número en la celda morada indica la concentración de dsDNA en ng/ul, pero esto puede ser incorrecto.
4. comprobar que la concentración es correcta, haga doble clic en la celda morada y cálculos deberían aparecer como se ve en la figura 4
-Se deben usar células A-J, K no está incluido en el gráfico de la célula y la célula de cálculo púrpura.
-La flecha roja apuntando hacia el 10 en la figura 2 representa la cantidad de ADN que fue alícuotas
* Si 5ul de la DNA fue alícuotas se debe cambiar este 10 a 5 (suponiendo también que 95ul de 1 Tampón X TE fue agregado)
Recuerde que estas muestras tenían una 1:20 dilución así mira el 1:20 celdas de dilución en la hoja de excel. Es la célula púrpura multiplicada por
20. que es el valor que deba ser registrado.
5. una vez que estos cálculos son correctos, la concentración de ADN, que apareció en la celda morada, registrar en el cuaderno de laboratorio
6 . Registrar las concentraciones de ADN en cada tubo de DNA con un marcador sharpie fino (Figura 3)
