Paso 5: Perfusión de tripsina
- Perfusión 0.02% tripsina / 0.05% el ácido etilendiaminotetracético (EDTA) a 37 ° C durante 1,5 h
- Inundar el agua del grifo durante 10min, luego alta solución salina durante 10 min.
Tripsina es una proteasa, es decir, una enzima que descompone otras proteínas. Tripsina es más activa a la temperatura corporal, tan caliente la solución a 37 ° C por adelantado. EDTA actúa sinérgicamente con tripsina: es un quelante de calcio, que las integrinas necesita interactuar con otras proteínas de adhesión celular, así que el EDTA por sí mismo aflojará los vínculos entre las células. Pero también actúa para absorber cationes divalentes que de lo contrario inhiben la actividad de la tripsina.
Este paso es uno de los caballos de batalla en términos de células abiertas de última hora y degradantes y descarga su contenido. Todavía verás mucha sangre que sale, pero definitivamente no es solo sangre solo y al final de este paso te darás cuenta el corazón obtener significativamente más claros.
Tripsina puede ser comprada en línea, pero si usted no puede conseguir sus manos en tripsina o quiere hacer una versión DIY, se pueden utilizar otras proteasas que son mucho más fáciles de encontrar. La bromelina es la enzima que es responsable de hacer el interior de su boca lastimada después de comer mucha piña cruda. Papaya fresca tiene una enzima similar llamada papaína. Ambos son bastante fáciles de encontrar como las enzimas digestivas en su tienda local de alimentos saludables. O en su supermercado local almacén bajo "ablandador de la carne"!
Son digestores bastante suaves, pero si el corazón se queda en ellos para demasiado largo, el andamiaje de colágeno también puede ser degradado. El protocolo de la Jove video recomienda 3 horas de perfusión de tripsina y probablemente no debería salir más largo que eso.
