Paso 3: Esterilización / Esterilizacion
IMPORTANTE: Si no vas a hacer la siembra inmediatamente, usted puede mantener los tubos cerrados en la nevera, pero sólo después de la esterilización. Debe esterilizarlas después de la colada o bien las bacterias y el hongo crecerá y comen y agotan los nutrientes.
Para hacer esto, llene la presión olla, pote o lo usas con agua, coloque los tubos dentro, (el agar-agar se LIQUEFY (Licuar) por lo que no deben ser horizontal) de pie y con la tapa del pero suelto, no cerrada (si utiliza tapones de algodón, que ya está bien, el algodón permite que el vapor viajar) y se coloca sobre el fuego baja. En el caso de la olla a presión, usted debe tiempo 15 minutos puesto que la válvula libera el vapor de agua pura (no aire). De esta manera, estás seguro de que los tubos sean estériles. Si no tienes una olla a presión, dejar en el bote cerrado para alrededor del mismo tiempo, recuerde que también debe tener alguna manera de liberar vapor para evitar altas presiones incontroladas. Lo hice así y tuve una ocurrencia del 16% del hongo (y en algunos casos, la semilla de todos modos). Después se realiza el procedimiento, abrir la olla a presión o maceta y si está utilizando tubos con tapón de rosca, cierre firmemente lo antes posible. Déjelos enfriar a temperatura ambiente y eso es todo!
Nota: Como verás en las fotos, mis tubos no están completamente verticales, porque mi olla no me permite hacerlo, así que tuve mantenerlos inclinados levantando los casquillos, para no perder el agar-agar.
Ahora es tiempo de esterilizar todo. ¿¿Por qué es importante? Bueno, el agar "condimentado" ahora es muy atractivo, no solo para las semillas, sino también para las bacterias y, especialmente, los hongos. La idea es destruir toda la contaminación existe actualmente en el medio y mantenerlo estéril.
IMPORTANTE: Si no se va a realizar el sembrado inmediatamente, se pueden mantener los tubos cerrados en la heladera, pero SOLAMENTE luego de haberlos listos. Yes realizarse la esterilización luego de dispensar el medio en los tubos, de lo contrario las bacterias y hongos crecerán y se comerán los nutrientes del medio.
Para realizar esto, agreguen un poco de agua en la olla a presión, cacerola o lo sea estén usando, coloquen los tubos dentro PARADOS (el agar-agar se va a licuar por lo no deben estar horizontales) y con la tapa puesta pero NO CERRADA LEVANTADORAS (si están usando tapones de algodón no es necesario hacer nada, el algodón permite el traspaso del vapor al interior del tubo) y coloquenlo un fuego bajo. En el caso de usar la olla una pressión, se deben contar 15 minutos desde la válvula libera vapor de agua puro (aire de pecado). De esta manera, nos aseguramos los tubos están estériles. Si no se tiene una olla a presión, coloquenlo en un recipiente cerrado por aproximadamente el mismo tiempo. Recuerden Yes también tener alguna manera de librerar el vapor para evitar nominales altas pecan control. Yo lo hice de esta manera y tuve una ocurrencia de hongos del 16% (y, en algunos casos, la semilla creció de todas formas). Luego del procedimiento, abran la olla o cacerola y, si están usando tubos con tapa a rosca, cierrenlos levantadoras lo antes posible. Dejenlos enfriar a temperatura ambiente y listo!
Nota: Como veran en las imágenes, mis tubos no están verticales ya olla de mi no me lo permite, por lo los coloqué inclinados, elevando la parte superior de los tubos, para evitar pérdida de agar-agar.
