Paso 15: La máquina funcionaba
Para probar la máquina, medimos una dilución seriada de 2.3 diaminophenazine. Esto producto de una reacción comúnmente utilizado en un tipo de prueba biológica llamado ELISA. En el ensayo, la sustancia a medir es captada en el pozo de la microplaca, generalmente por un anticuerpo específico. Una enzima llamada peroxidasa de rábano se une el anticuerpo y esta cataliza la conversión de un compuesto incoloro o-fenilendiamina dihidrocloruro (OPD) en uno amarillo: diaminophenazine 2.3. La reacción se muestra en la foto de arriba.
La intensidad del color está directamente relacionada con la concentración de la sustancia siendo analizada y el análisis puede ser adaptado a diferentes sustancias mediante el uso de diferentes anticuerpos.
Establecer un rango de concentraciones de 2,3 diaminophenazine para probar la máquina y comprobar en un espectrofotómetro comercial. La máquina que utilizamos fue relativamente barato - unos 10.000 £. Los gráficos de la máquina comercial y nuestro espectrofotómetro se demuestran arriba.
Tengo que decir, esto funcionó mejor de lo que imaginamos que lo haría. Los datos son realmente bastante bien, aunque la máquina comercial puede leer absorbancia superior con exactitud - la linealidad se rompió en el sobre una = 1.0 para nuestra máquina. A una absorbancia de 1, sólo el 10% de la luz lo hace al detector y así la sensibilidad del detector se convierte en importante. Te darás cuenta que el gradiente de las dos líneas es diferente, aunque esto podría ajustarse por afinar el cálculo en el código. Lo más importante, la máquina logró completar un circuito completo de las 96 muestras en una alineación perfecta y luego volver sí mismo hasta el punto de inicio.
